钙黄绿素乙酰甲酯

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Calcein, AM

CAS#：148504-34-1

中文名：3'-O-乙酰胺-2',7'-二（羧乙基）-4或5-羧基荧光素,二乙酰甲酯

英文名：3',6'-Di（O-acetyl）-4',5'-bis[N,N-bis（carboxymethyl）aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester

别名：钙黄绿素乙酰甲酯

分子式：C46H46N2O23

分子量：994.86

性质：

　　1. 外观：白色或浅黄色晶体

　　2. 纯度：≥90%（HPLC）

　　3. 产品描述：

Calcein, AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Calcein，从而被滞留在细胞内，发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如BCECF, AM和CFDA）相比，Calcein, AM的细胞毒性很低。Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。

Calcein, AM仅对活细胞染色。作为核染色染料的PI不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光（激发：535 nm，发射：617 nm），因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发，仅可观察到死细胞。根据以上特点，Calcein, AM和PI经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。

由于不同细胞系的最佳染色条件不同，我们建议个别确定Calcein, AM和PI的合适浓度。

　　4. 使用方法

　　（1）用DMSO制备1 mM 的Calcein, AM溶液，并用PBS将其稀释制成1～50 μM的Calcein, AM溶液。注：如果Calcein, AM很难进入细胞，可以使用表面活性剂，如Pluronic F127。

　　（2）将1/10细胞培养基体积的Calcein, AM溶液加入到细胞培养基中。注：也可以用1/10浓度的Calcein, AM溶液代替培养基。

　　（3）在37℃培养细胞15～30分钟。

　　（4）用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次。

　　（5）用490 nm激发波长，515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

　　储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。